我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大？加多少？

女青年﹌ · 发表于昨天 13:05

提取DNA后的电泳条带如果不是特别暗，PCR时如果总体系是25μl，DNA模板加0.7～1μl都行，自己摸索下。
做PCRDNA模板太多不好，有点就行～

憾清线 · 发表于昨天 14:15

我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度，纯度倒是要注意一下，紫外分光达到1.8即可，不过我们一般也不去检测。
PCR的时候可以设置梯度，分别加0.5μl，1μl，1.5μl，2μl，2.5μl，3μl。
不要低于0.5μl，也不要高于3μl。选择几个梯度做一下看看哪个效果好就用哪个。有时候为了省钱，就直接用1μl上去P，一般问题不大，出了问题再回头做梯度也不迟。
总而言之，使得模板量在1μl左右最好。

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